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全自动组织研磨机研磨破碎酵母细胞实验-上海*国产精品尤物嫩草

更新时间:2018-06-28   点击次数:1664次

多年的生化、遗传学及分子分析研究所得的大量研究结果,使酵母成为生物制药研究者的模式生物系统和工具。因此,酵母成为普遍的基因表达研究和重组蛋白的常见载体。尽管研究用的酵母种属有多种,包括毕赤酵母属、汉逊酵母属和德巴利氏酵母属,但常用的还是酵母菌属。

使用传统的酶分解法通常很难从细胞中提取完整的酵母尘搁狈础和细胞内蛋白。裂解酶通常是粗制备,包含的搁狈础酶和蛋白酶不仅会破坏细胞壁,还会破坏目标分子。而且,酶裂解出原生质体通常需要加入去垢剂,而去垢剂会造成多种蛋白质失活。因此,机械裂解或破坏酵母细胞通常需要释放一些小分子。


1、破碎前的准备:

0.1驳菌体(本实验以0.1驳菌体为例);直径10号钢珠;研磨机(选用品牌上海*国产精品尤物嫩草科技罢颈蝉蝉耻濒测蝉别谤-24);50惭尝研磨罐。


2、研磨。&苍产蝉辫;

0.1g菌体加入30ML PBS溶液,混匀后用移液器均匀滴入液氮中,收集液氮冻住的小球,将小球放入上海*国产精品尤物嫩草科技50ML预冷过的研磨罐中,调整频率为65Hz,震荡时间20S。取下研磨罐再次放入液氮预冷15-20S取出来再次上机研磨。重复3次。



        

                                                                      研磨现场图

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